孔雀石綠殘留快速檢測技術(shù)

1 什么是孔雀石綠?

孔雀石綠作為染色劑常被用于皮革業(yè)、紡織業(yè)、制陶業(yè)、食品和生物等領(lǐng)域，是人工合成的三苯甲烷類化學(xué)物。同時(shí)，孔雀石綠也可以作為殺菌劑、驅(qū)蟲劑，用于預(yù)防與治療水生動(dòng)物的細(xì)菌、真菌和寄生蟲感染，由于其成本低廉且*，因此被普遍用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)。然而隨著研究的深入，孔雀石綠高毒性、高殘留的性質(zhì)及潛在的致畸、致癌、致突變等毒副作用備受研究人員和消費(fèi)者關(guān)注。鑒于孔雀石綠潛在的致癌性，美國、加拿大、日本、歐盟等國家將其列為水產(chǎn)養(yǎng)殖禁用藥物。歐盟法案2002/675/EC規(guī)定，動(dòng)物源性食品中MG(孔雀石綠)和LMG(無色孔雀石綠)殘留*為2μg/kg;日本肯定列表明確規(guī)定，在進(jìn)口水產(chǎn)品中不得檢出MG殘留。我國于2002年5月將孔雀石綠列入《食品動(dòng)物禁用的獸藥及其他化合物清單》，并于2005年制定了孔雀石綠的使用標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)定水產(chǎn)品中的MG和LMG的殘留總*不得超過1μg/kg。盡管如此，違規(guī)使用孔雀石綠的事件仍然時(shí)有發(fā)生——歐盟、日本、中國香港等國家和地區(qū)均曾從由我國大陸進(jìn)口的鰻魚中檢測出MG和LMG殘留，這不僅影響生態(tài)環(huán)境，還會(huì)成為制約我國大陸地區(qū)食品質(zhì)量安全和市場競爭力的重要因素。

 

2 檢測技術(shù)的應(yīng)用

孔雀石綠進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)后會(huì)快速代謝為無色孔雀石綠，而無色孔雀石綠為脂溶性物質(zhì)，相較孔雀石綠而言毒性更強(qiáng)，且基本無法代謝。國內(nèi)外均以孔雀石綠及其代謝物無色孔雀石綠的總量為測定指標(biāo)，目前測定方法主要有儀器分析測定法(高效液相法、液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法等)、免疫學(xué)檢測技術(shù)(酶聯(lián)免疫檢測技術(shù)、膠體金檢測技術(shù)等)，以及微光探測與免疫學(xué)技術(shù)的結(jié)合方法(熒光定量檢測技術(shù))等。對(duì)于快速篩查市場而言，后兩種方法已逐漸成為檢測應(yīng)用的主流手段。

 

2.1 儀器分析法

儀器分析法主要是指利用氣相色譜法、氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法、液相色譜法、高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法或各類光譜儀等大型精密儀器來進(jìn)行藥物殘留的分析方法。這是一種準(zhǔn)確性高、靈敏度高、特異性好、選擇性強(qiáng)的檢測方法，現(xiàn)普遍用于檢測獸藥和農(nóng)藥殘留，許多國家和地區(qū)已將高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法作為檢測水產(chǎn)品中孔雀石綠殘留的確證方法。但是，此方法不僅需要使用昂貴的檢測儀器，還需專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行操作，無法實(shí)現(xiàn)大批量快速檢測。同時(shí)，該方法成本相對(duì)較高，且不具備現(xiàn)場快速篩查的相關(guān)條件。

 

2.2 免疫學(xué)檢測技術(shù)

免疫學(xué)檢測技術(shù)利用抗原與抗體的特異性結(jié)合原理，相較于儀器分析法而言，其大的優(yōu)勢(shì)為操作便捷，有利于實(shí)現(xiàn)市場的快速篩查。現(xiàn)階段，用于食品安全的免疫學(xué)檢測技術(shù)主要有酶聯(lián)免疫檢測技術(shù)和膠體金檢測技術(shù)。

 

2.2.1 酶聯(lián)免疫檢測技術(shù)

該技術(shù)的原理是應(yīng)用抗原和抗體的特異結(jié)合與酶催化作用的有機(jī)結(jié)合，利用酶促反應(yīng)原理放大了免疫檢測的效果，在具有較高靈敏度的同時(shí)還具備了定量檢測的特性。這一檢測技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是檢測靈敏度高、特異性好、高通量和高精密度，且無需大型儀器設(shè)備就可進(jìn)行大批量的樣品初篩檢測。該法雖然較儀器法具有一定優(yōu)勢(shì)，但由于其檢測時(shí)需專業(yè)人員操作，且檢測時(shí)間較長，亦無法滿足現(xiàn)場快速篩查的需求。

 

2.2.2 膠體金檢測技術(shù)

膠體金檢測技術(shù)是以納米金顆粒作為示蹤標(biāo)識(shí)物，利用抗原和抗體具有特異性結(jié)合的原理所建立的新型免疫標(biāo)記技術(shù)，是色譜層析技術(shù)和納米金技術(shù)的有機(jī)結(jié)合。該技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是操作簡單、檢測時(shí)間短且無需專業(yè)技術(shù)人員操作，因此膠體金技術(shù)被廣泛應(yīng)用于大分子類蛋白、農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、小分子類藥物和毒素類等的快速檢測中。雖然膠體金法具有一定的優(yōu)勢(shì)，但由于其靈敏度較差，有漏檢風(fēng)險(xiǎn)，仍無法滿足國家檢測標(biāo)準(zhǔn)的要求。

 



 

深芬儀器生產(chǎn)的CSY-JAS水產(chǎn)品孔雀石綠檢測儀應(yīng)用競爭抑制免疫層析的原理，通過檢測線熒光定量卡中的熒光強(qiáng)弱程度，定量分析待檢樣品中孔雀石綠殘留含量。